Identification of Differentially Expressed Genes and Elucidation of Pathophysiological Relevance of ABCA1 in HaCaT Cells Induced by PM2.5
Objetivo. Investigar los efectos de las PM2.5 sobre la proliferación, el ciclo celular, la apoptosis y el mecanismo potencial de la línea celular de queratinocitos humanos HaCaT. Métodos. Las células HaCaT fueron tratadas con diferentes concentraciones de suspensión de PM2.5 durante 24 horas. La viabilidad celular se detectó mediante el método CCK-8. La distribución del ciclo celular y la apoptosis se detectaron por citometría de flujo. Se utilizaron análisis de microarrays para conocer el perfil de expresión génica de los mismos; el procesamiento de los datos incluyó el enriquecimiento de genes y el análisis de vías. Se realizó un Western blot para validar las vías y reguladores clave en el análisis de microarrays. Resultados. La actividad celular disminuyó y el ciclo celular se inhibió significativamente con el aumento de la concentración de PM2,5. Además, al realizar el ensayo de microarrays de expresión génica, identificamos 541 genes regulados al alza y 935 genes regulados a la baja en las células HaCaT tratadas con PM2,5. La qPCR en tiempo real y el western blot confirmaron que el tratamiento con PM2.5 podía inducir la expresión de ABCA1 mientras que inhibía la de END1 y CLDN1. Conclusión. Nuestros resultados mostraron que PM2.5 podría regular potencialmente la apoptosis celular y la detención del ciclo celular a través de las vías mediadas por ABCA1-, END1-, ID1- y CLDN1 en las células HaCaT humanas, lo que sentó una buena base para el seguimiento de la intervención farmacológica y el desarrollo de fármacos contra el daño cutáneo causado por la exposición a PM2.5.
Fuente:
Revista Virtual Pro
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